Cryo-Ultramicrotome

Die Ultramikrotomie ist eine Methode zur Probenvorbereitung für Untersuchungen mittels Mikroskopiemethoden, wie TEM, REM, AFM und LM. Dabei werden ultradünne Schnitte von Proben erstellt. Diese Proben sind meist weiche Materialien, Werkstoffe oder biologische Materialien. Die typische Dicke solcher Schnitte liegt bei der Ultramikrotomie zwischen 10 und 500 nm.

Die Probe wird vor der Mikrotomie meist fixiert und eingebettet. Dazu wird zum Beispiel Paraffin oder Kunstharz verwendet. Um einen perfekten Schnitt zu erhalten, müssen diese „Blöcke“ zunächst vorgetrimmt werden. Dazu steht ein Trimmer EM TRIM2 der Firma Leica bereit.

Mit diesem Gerät wird die Frontseite des „Blocks“ soweit zurecht geschnitten, bis die Probe zu sehen ist und eine glatte Fläche vorhanden ist. Das Mikrotom besteht aus einem Messerblock, welcher unbeweglich ist, und dem Probenhalter, der mechanisch und automatisch bewegt werden kann. Über ein Mikroskop kann zu jeder Zeit die Bearbeitung der Probe beobachtet werden.

Die Probe wird über die Diamantklinge bewegt, wodurch die Schnitte entstehen. Nach jedem Schnitt sorgt ein Vorschubmechanismus für die Verschiebung der Probe um eine definierte Weite, um gleichmäßig dicke Schnitte zu gewährleisten. Diese werden in einem Wasserbad hinter der Klinge gesammelt, woraus Sie entnommen und auf einem Träger zur Mikroskopie fixiert werden können. Bei Probenmaterialien, die temperaturempfindlich sind, wird das Kryo-Ultramikrotom verwendet. Durch das Aufsetzen einer Kryo-Kammer kann der Bereich, in dem die Schnitte erfolgen, mit flüssigem Stickstoff gekühlt werden. Dadurch erhöht sich die Härte der Probe und kann damit geschnitten werden.

Spezifikationen:

Der Trimmer besteht aus einem S6 Stereomikroskop mit 0.63-4.0-fachem zoom Objektiv. Die Fräse besitzt eine Wolframcarbid-Spitze mit einem Durchmesser von 8 mm und rotiert mit einer Geschwindigkeit von 20000 rpm mit einer Genauigkeit von 1 µm. Die Probe kann in Etappen von 90° um 360° gedreht werden, um eine perfekte Schnittfläche zu gewährleisten.

 Kryokammer