Leica DMI6000B
Raum 1.035 im 1. OG des Medizinischen ForschungszentrumsWeitfeld Fluoreszenz- und Zeitraffermikroskop
Bei dem Leica DMI6000B handelt es sich um ein vollautomatisiertes Epi-Fluoreszenz-Weitfeldmikroskop, optimiert für den Einsatz in der Lebendzellmikroskopie. Dafür besitzt es einen motorisierten, in x, y und z verfahrbaren 3-Platten-Mikroskoptisch und Autofokusfunktionen (adaptive Fokuskontrolle (AFC) und automatischer Autofokus).
Die Transmissionsbeleuchtung erfolgt über eine Halogenglühlampe mit vorgesetztem, schnell schaltbarem Shutter. Die Fluoreszenzbeleuchtung, ist über eine Quecksilber-Kurzbogenlampe realisiert ist. Über sehr schnell schaltende Filterräder können folgende Anregungswellenlängen generiert werden:
| 340+/-13nm (z.B. Fura340) | 490+/-10nm (z.B. FITC) |
| 360+/-20nm (z.B. DAPI) | 504+/-6nm (z.B. YFP) |
| 387+/-5nm (z.B. Fura380) | 555+/-12,5nm (z.B. TxRed) |
| 427+/-5nm (z.B. CFP) | 645+/-15nm (z.B. Cy5 oder AF647) |
Für optimale Fluoreszenzaufnahmen verügt das System über folgende, automatisch einschwenkende dichroitische Strahlenteiler:
| 1. „TRX“ - ECFP / EYFP / mCherry | Tm >90%: 457-483; 522-555; 602-663 |
| 2. „TRS“ - DAPI / FITC / TRITC / (Cy5) | Tm >90%: 437-474; 506-539; 575-622; 665-711 |
| 3. „FU2“ - Fura 2 | Tm >93%: 415-950 |
| 4. „FRE“ - CFP / YFP - FRET | Tm >90%: 449-483; 530-569 |
Die Bildgenerierung erfolgt über eine Leica K3M CMOS Kamera (Sensorformat: 3.072x2.048 Pixel, Pixelgröße: 2,4 x 2,4 µm). Vor der Kamera ist ein weiteres Filterrad mit folgender Konfiguration platziert, über welches die Emissionssignale gefiltert werden können.
| Blau: 455+/-25nm | Rot: 605+/-26nm |
| Grün: 525+/-18nm | Tiefrot: 705+/-36nm |
Folgende Objektive stehen in dem System zur Verfügung:
|
Objektivtyp |
Vergrößerung |
Kontrast |
Numerische Apertur |
Arbeitsabstand (mm) |
Immersion |
|---|---|---|---|---|---|
|
HC PL FLUOTAR Leica: 506224 |
5x |
BF, DIC, P, DF, IMC, FLUO |
0.15 |
13.7 |
Luft |
|
HC PL FLUOTAR L Leica: 506243 |
20x |
BF, DIC, P, DF, PH, IMC, FLUO |
0.4 |
7.7-6.2 |
Luft |
|
HC PL FLUOTAR L Leica: 506203 |
40x |
BF, DIC, P, DF, PH, IMC, FLUO |
0.6 |
3.3-1.9 |
Luft |
|
HC PL APO Leica: 506220 |
100x |
BF, DIC, DF, FLUO |
1.4 |
0.09 |
Öl |
Für den Einsatz in der Lebendzellmikroskopie ist das Mikroskopstativ in einer PECON "Incubator BLX Black" Klimakammer eingehaust. Über diese können Präparate für längere Zeit bei 37 °C und 5 % CO2 inkubiert und mikroskopiert werden.
An dem System sind folgende LASX-Softwaremodule verfügbar:
| - 11640032 AF6000 Mehrkanal Aufnahme |
| - 11640031 AF6000 Zeitreihen Aufnahme |
| - 11640030 AF6000 z-Stapel Aufnahme und Autofokus |
| - 11640029 AF6000 Mark & Find mit Steuerung motorischer Tische |
| - 11640028 AF6000 Stitching (Mosaikaufnahmen) |
| - 11640025 AF6000 Calcium Imaging |
| - 11640804 AF6000 3D-Visualisierung |
>>Das Mikroskop kann nur in enger Absprache mit der EMU genutzt werden, um die Abläufe an den anderen Geräten der EMU nicht zu stören!<<